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KP4-3人胰腺導管腺癌細胞

更新時間:2025-12-26

簡要描述:

KP4-3人胰腺導管腺癌細胞
上海研尊生物提供專業(yè)的細胞資源庫
ATCC細胞庫、DSMZ細胞庫、CLS細胞庫、JCRB細胞保藏中心、ECACC細胞庫、KCLB細胞庫、RCB細胞庫、RIKEN細胞庫、Sigma細胞庫、中科院細胞庫
進口引種細胞系,種類齊全,帶有STR鑒定、支原體檢測、測序驗證,細胞來源可靠、背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好

型號:點擊量:204
品牌研尊生物貨號YZ6977
規(guī)格1 X 106cells/T25或1 mL凍存管供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研實驗

                                                                                                  KP4-3人胰腺導管腺癌細胞
上海研尊生物提供專業(yè)的細胞資源庫
ATCC細胞庫、DSMZ細胞庫、CLS細胞庫、JCRB細胞保藏中心、ECACC細胞庫、KCLB細胞庫、RCB細胞庫、RIKEN細胞庫、Sigma細胞庫、中科院細胞庫
進口引種細胞系,種類齊全,帶有STR鑒定、支原體檢測、測序驗證,細胞來源可靠、背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好

細胞名稱:KP4-3人胰腺導管腺癌細胞

品牌:上海研尊生物
貨期:現(xiàn)貨
細胞數(shù):1x10^6 cells
細胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

種屬來源:人
性別年齡:男性,50歲
組織來源:胰腺
生長特性:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮樣
細胞規(guī)格:1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養(yǎng)條件:DMEM/HamF12 + 10% fetal bovine serum (FBS)
          37 ℃, 5% CO2
凍存條件:90% FBS + 10% DMSO
傳代方法:1:8傳代,3-4天傳1代

細胞培養(yǎng)操作
干冰運輸:收到細胞后需立即轉(zhuǎn)入液氮保存、或者-80°C冰箱短期凍存、或者直接復(fù)蘇
常溫運輸:收到細胞后,請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出,并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代
細胞傳代:細胞密度達80% - 90%,即可進行傳代培養(yǎng)
培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟
 對于貼壁培養(yǎng)的細胞,寄送前,我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶,以減少產(chǎn)品運輸過程中貼壁細胞的脫落。
1.收到細胞后,請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。因為運輸過程中存在顛簸,且有些細胞對溫度變化也很敏感,可能存在一些細胞脫落漂浮的情況,這些細胞仍是活細胞,請勿丟棄,可離心富集后傳代使用。
2.對于貼壁細胞,在生物安全柜環(huán)境中,用真空泵去除培養(yǎng)瓶中多余的培養(yǎng)基,至剩余5-8mL 左右,隨后根據(jù)培養(yǎng)基選擇合適的CO2含量的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),擰松瓶蓋。如果細胞已經(jīng)長滿培養(yǎng)瓶,請立即傳代。
3.對于懸浮的細胞,在生物安全柜環(huán)境中,轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細胞至離心管,150 g 離心 5 分鐘,去除上清后,用5 mL培養(yǎng)基吹散細胞,轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,隨后置于合適的CO2含量的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
凍存管細胞操作步驟
注意: 為保證細胞的高活率,請收到產(chǎn)品后,立即解凍培養(yǎng)。
1.將凍存管置于37℃水浴中來回晃動,迅速解凍。為避免污染,確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速,大約1分鐘。
2.一旦凍存管中液體融化后,立即取出,采用酒精噴拭凍存管表面。從此步開始,后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完培養(yǎng)基的離心管中,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。
4.用完培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細胞復(fù)蘇的存活率,請將培養(yǎng)基在37℃水浴預(yù)熱后使用。
5.將細胞置于含有合適CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
貼壁細胞傳代培養(yǎng)
1.吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基,加入PBS潤洗一次。
2.加入1 mL 0.25 (w/v) Trypsin-EDTA 溶液,并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育,直至細胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3-5分鐘。
3.加入2mL完培養(yǎng)基中和胰蛋白酶,并輕輕吹打?qū)⒓毎麖呐囵B(yǎng)瓶表面吹落,并使細胞分散。
4.將細胞懸液收集到15mL離心管里,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。取適量的培養(yǎng)基將細胞重懸,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
懸浮細胞傳代可參考以下方法:
一、直接傳代法
1.待懸浮細胞長滿至 80%~90%(細胞懸液變黃),即可傳代;
2.用吸管吸棄細胞懸液 1 / 2~1 / 3;
3.加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
 二、離心傳代法(在發(fā)現(xiàn)有細胞碎片的情況下)
1.將細胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi);
2.150 g 離心 5 min,棄去上層清液;
3.使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細胞;
4.吸管吸取適量細胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存操作
1.1000rpm離心5分鐘去掉上清。加1 mL血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1 x 106/mL,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識;
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80°C冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存

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